中谱蓝PD-C18色谱柱使用说明书

尊敬的客户非常感谢您购买和使用中谱科技生产的产品，中谱红，中谱蓝等一系列高效液相色谱柱。
液相色谱柱是比较娇贵的色谱耗材，其有着严格的生产标准和测试方法，每一根色谱柱出厂都有检测报告保证其各项指标的符合质量标准，用户放心使用。

一、使用前的检查和须知事项
1.检查包装盒是否完整，盒子侧面有产品信息与自己购买的是否一致。
2.打开包装检查色谱柱表面有无伤痕，柱两端是否有塑料堵头完全封住。
3.查看盒内是否有检查报告及签名，检查报告中有详细记录，填料批号、货号、序列号及柱性能等参数。

二、色谱柱安装
为了保证色谱柱使用的顺畅及高效，连接管路尽量使用合适的细径管线，柱的两端连接非常匹配连接管端口务必平整。使用时先将两头的堵头取下，流动相的流动方向与色谱柱标签上方向一致，用连接管路连接上即可，注意力度适当。
如使用3.0，2.1窄径柱时，需要优化系统减少谱带展宽，包括检测器需要微量流通池，减少进样器体积，使用较小内径（如1 /32）管线，并确保管路与色谱柱连接恰当，尽量减少死体积。

三、色谱柱正确使用
1.中谱科技色谱柱出厂都有存储液，使用时用互溶试剂替换。
2 使用前用洁净的水与乙腈冲洗系统，确保系统干净，不含任何缓冲盐和污染物。
3 将新色谱柱入口端接上系统，出口端先不要连接，在低流速条件下0.2mL/min用纯乙腈润洗色谱柱（色谱柱时间长的话柱头2端储存液容易干），然后2分钟后流速升高到0.5，当溶剂均匀从柱口端流出，停泵，再将出口端连接到系统检测器上（这样可以避免气泡进入检测系统，并且可以快速达到平衡）。备注：如果是色谱柱粒径是3μm及以下的流速就减半，防止压力过高。
4 也是先低流速开始0.2mL/min 逐步过渡到正常流速，待基线平稳后（5-10倍柱体积）换成流动相平衡，带基线平衡后开始进样。
5 当流动相有缓冲盐或离子对试剂时需要确保柱内有充足的水，再此前用90:10（水：乙腈）充分过渡半小时以上，再换成流动相平衡，待到平衡好后再进样。

四、色谱柱保存
①不含缓冲盐或离子对试剂项目：
使用流动相冲洗至基线平稳，换成乙腈：水=2：8冲洗半小时（流速1mL/min），再换成乙腈保护30分钟，最后色谱柱应使用堵头将2端密封。
②含缓冲盐或离子对试剂项目：
使用流动相冲洗至基线平稳，换成乙腈：水=1：9冲洗1小时（流速1mL/min），再换成乙腈保护30分钟，最后色谱柱应使用堵头将2端密封。注意，缓冲盐容易析出，再使用前和结束后需要多用高比例水冲洗。

五、色谱柱PH范围
每款色谱柱都有自己的PH范围，使用时务必看清楚其使用范围，超出其范围会使硅胶溶解或键合相脱落，造成色谱柱损坏。

六、色谱柱维护保养
色谱柱使用一段时间后容易出现各种问题
1.柱压升高：一般是柱头筛板污染（固体颗粒或强保留物），可以用溶解污染物的溶剂长时间的反向冲洗（低流速0.5mL/min）2小时以上，或者使用保护柱套。
2.缓冲盐正确使用：缓冲盐溶于水却很难溶于有机试剂，使用后应该高比例水冲洗色谱柱。
3.强保留物滞留色谱柱：其在色谱柱中一段时间积累后会产生额外的保留行为，引起峰变宽，拖尾柱效下降等，同时柱压也会不断升高而使色谱柱损坏。建议用50℃左右甲醇：水=1：3（流速1mL/min）冲洗1小时之后换成3：1再冲洗1小时，温度越高，溶解性更好，我们的填料都可以耐高温，可以高达100℃。

七、 进行实际样品分析的推荐步骤：
1.确保流动相洁净，每隔24-48小时就应配置流动相，并经常清洗流动相溶剂瓶，以免流动相长菌，确保实验室水系统工作正常。
2.确保样品不含颗粒杂质，如样品过脏或有微粒存在就不能直接进样，一般先用滤膜，建议用0.22μm的过滤。
3.确保样品与流动相条件相兼容，进样后不会发生沉淀，通常使用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液（有机比列较低的）溶解或稀释样品。
4.常规分析过程中，每针间隔若干针清洗柱内可能累积的污染物，完成分析后彻底清洗色谱柱，除去缓冲盐和污染物。