中谱科技(福州)有限公司

氨基柱使用说明书

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产品信息

尊敬的客户非常感谢您购买和使用中谱科技生产的产品,中谱红,中谱蓝等一系列高效液相色谱柱。
液相色谱柱是比较娇贵的色谱耗材,其有着严格的生产标准和测试方法,每一根色谱柱出厂都有检测报告保证其各项指标的符合质量标准,用户放心使用。

 

概述:

氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道;但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦,对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与将要使用的流动相极性不同不互溶就会造成色谱柱损坏,所以切换正反向流动相时请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。

 

氨基柱的清洗:
简单说起来,正相条件下使用的氨基柱可参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用氨基柱可参照C18的清洗方法。


正相条件下使用:
1)确保系统内不含缓冲盐,如果有则需要先除去管路中的缓冲盐;
2)取下色谱柱,用二通管代替色谱柱连接好管路;
3)用甲醇或乙腈以2.0mL/min冲洗15min,除去管路中的水;
4)用异丙醇以2.0mL/min流速冲洗15min,除去管路中的甲醇或乙腈;
5)取下二通管,换上色谱柱,用异丙醇以0.5mL/min冲洗色谱柱45min;
6)换上纯正己烷作流动相过渡,以1.0mL/min冲洗色谱柱15min;因为异丙醇的极性很强,哪怕是少量的异丙醇进入到流动相中都可能引起保留时间的显著变化。
7)换上分析流动相走基线,通常这个过程至少需要30min,基线平稳后进样。


正相体系换成反相体系的方法:
1)取下正相色谱柱,用二通管代替色谱柱连接管路,用异丙醇以2.0mL/min冲洗15min;
2)换上纯甲醇或乙腈,以2.0mL/min冲洗10min;


使用方法:
1.氨基柱用于正相条件,使用时需注意如下事项:
1)因为出厂时氨基柱保存在正己烷/异丙醇=95/5中,所以正相条件下使用时可以直接用流动相跑基线。
2)由于基质具有较强的吸附性能,为防止强保留物质在色谱柱中的存留,每天分析任务完成后,需用异丙醇以0.5mL/min流速冲洗色谱柱60min,最后保存在异丙醇中;
3)长时间保存最好用异丙醇冲洗色谱柱后,用正己烷封存,然后拧紧两端的塑料筛头。


2.反相使用
1、因为出厂时氨基柱保存在正己烷:异丙醇体系中,使用时先用异丙醇(0.2mL/min)过渡1晚,再用乙腈以0.5mL/min的流速冲洗3小时,后换成流动相冲洗1小时后待基线平衡后开始做样,由于氨基柱需要过渡饱和,一般前面几针效果不一定能达到要求,所以多进几针饱和后就正常了。
2、保存方法和反相柱相近,用乙腈冲洗1小时,如有缓冲盐用乙腈水和流动相比例接近冲洗1小时后换成乙腈冲洗40分钟。如短期不用,乙腈保存;长期不用时需依次用甲醇、异丙醇置换,最后用正己烷保存。

 

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