正相HILIC使用说明书
产品信息
概述
HILIC 色谱柱系列包括Silica, CN, NH2和 HILIC-Amide 等多种固 定相，广泛地应用于制药、食品、环境、化工、科研等领域中 的分析检测。
特性
. 单分散硅胶基球，分离效率高、传质速度快、机械强度 高
. 固定相种类多，选择性范围广
. 批次间重现性好
色谱柱性能参数
推荐仪器参数
注意：
仪器的死体积在一定程度上会影响到色谱柱的柱效测试， 请使用 0.1 - 0.3 mm 内径的管线作为连接管路，为了防止因 柱外扩散而导致的峰宽扩展，管线不应配置过长。
在对窄径柱（内径小于 3.0 mm ）进行测试时，需注意流 通池的体积（小于 2.5 μL）。
操作指南
. 按照上述的操作参数规范操作。
. 按照色谱柱标签上标记箭头的方向使用。
. 小心保管，避免柱子受到任何物理冲击。
. 避免任何情况下的压力激增。
. 在流动相制备中，应使用高纯度缓冲盐、酸碱添加剂、 色谱级有机溶剂和去离子水。
. 为了防止盐中或流动相的配制过程中引入不溶性杂质堵 塞色谱柱或系统，流动相需过滤后再使用。
. 首次使用色谱柱时，先用乙腈冲洗 10 倍柱体积，然后逐 步过渡到流动相平衡充分后使用。
. 正相切换到HILIC 条件用时，依次使用异丙醇、乙腈以正 常使用流速的 50% 以下冲洗至少 10 倍柱体积；HILIC 条 件切换到正相时应以相反的顺序冲洗。
. 为了防止流动相中的盐在色谱柱或系统中析出，从高盐 流动相体系向高有机相过渡时，应先使用与流动相构成 比例相同或有机相比例较低的水溶液冲洗至少 5 倍柱 体积作为缓冲，然后向高有机相过渡。
. 为确保数据的质量，使用前应用至少 10 倍柱体积的流 动相平衡色谱柱。
. 在分析实际样品或污染性较高（中药提取物、食品、环 境污染物）的物质时，建议进行样品前处理并使用保护 柱以延长色谱柱寿命。
. 不使用时，请确保色谱柱塞好柱塞以防止溶剂挥发使色谱 柱内的填料干涸，影响色谱柱性能。
色谱柱的清洗及再生
色谱柱的污染会导致峰形的变化、峰分裂、肩峰、柱效的变 化或反压的增加。用户可尝试以下方法进行清洗。
清洗再生程序
第一步：异丙醇（5 倍柱体积）
第二步：50%乙腈水溶液（5 倍柱体积）
第三步：含 0.1% EDTA 的水溶液（10 倍柱体积）
第四步：0.2M 醋酸铵水溶液（20 倍柱体积）
第五步：50%乙腈水溶液（5 倍柱体积）
第六步：乙腈（10 倍柱体积，封存）
注意：
1. 在对色谱柱进行清洗时，为了避免色谱柱上的污染物 或其他物质进入流通池，需断开色谱柱与检测器之间的连接；
2. 在进行色谱柱清洗再生时，建议使用平时使用流速的 50%进行操作，防止因溶剂粘度过大而造成柱压的激增。
3. 不建议使用者擅自打开色谱柱。
色谱柱的存储
. 应使用纯有机溶剂储存。正相模式应保存在纯正己烷或 异丙醇中；HILIC 模式应保存在纯乙腈中。
. 在 HILIC 模式中，如果色谱柱在储存前使用的流动相体 系中含盐，则需先用 20%的乙腈水溶液冲洗 5 倍柱体 积，然后用纯乙腈冲洗 10 倍柱体积后储存。