支持与应用
肉制品中苯甲酸与山梨酸的测定
发布时间：
2019-02-14
1、适用范围
适用于肉制品、红酒中苯甲酸与山梨酸含量的检测。
2、溶液的配置
苯甲酸标准储备液（1mg/mL）：称取苯甲酸标准品50mg，置于50ml容量瓶中，加入2.5ml乙醇溶解，用水定容至刻度。
山梨酸标准储备液（1mg/mL）：称取山梨酸标准品50mg，置于50ml容量瓶中，加入2.5ml乙醇溶解，用水定容至刻度。
苯甲酸、山梨酸混合标准工作液（10μg/mL）：分别量取1mg/mL苯甲酸标准储备液1.0mL、1mg/mL山梨酸标准储备液1.0mL至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。
洗脱液：甲酸/甲醇水=2/98（8：2）：量取甲醇400mL、水100mL混匀，该溶液即为80%甲醇水；取490mL 80%甲醇水，加入10mL 甲酸，混匀，该溶液即为洗脱液。
磷酸盐缓冲溶液（流动相）：分别称取2.5g KH2PO4、2.5g K2HPO4于1L容量瓶中，加水定容至刻度。
3、提取步骤
一、熟牛肉：
称取1g样品，于50ml离心管中，加入2ml三氯甲烷，10ml水，充分匀浆后8000rpm/min 离心5min。取上清液待净化。另使用15ml水清洗匀浆机刀头，清洗液倒入样品残渣中再提取一次，8000rpm/min 离心5min，合并两次上清液待净化。
二、红酒
量取1ml样品，加入0.5mL 1mol/L氢氧化钠溶液，待净化。
4、SPE净化步骤
SPE柱：月旭Welchrom® P-SAX，规格：200 mg/6mL。
活化：5mL甲醇，5mL水，弃去
上样：待净化液全部上样，弃去
淋洗：5mL水（润洗离心管），弃去，抽干
洗脱：5mL洗脱液，收集于15ml离心管中，抽干
50℃氮吹至约500μL，用流动相定容至5ml，上HPLC检测。
5、注意事项
1） 上样速度不能过快，保持在1ml/min；
2） 红酒加标过程：1ml样品中，分别加入10μg/mL标准使用液25μL、100μL、1mL，其加标水平即为0.25mg/L、1mg/L、10mg/L。
3） 熟牛肉加标过程：1g样品中，分别加入10μg/mL标准使用液25μL、100μL、1mL，其加标水平即为0.25mg/kg、1mg/kg、10mg/kg。
6、色谱条件
色谱柱：月旭Ultimate®XB-C18（4.6 x 250 mm, 5 μm）
流动相：磷酸盐缓冲溶液/乙腈=(9/1)
流速：1.2mL/min
柱温：30℃
进样量：20μL
检测波长：227nm；
7、色谱图及加标回收率结果
表1：相关峰信息
表2：熟牛肉样品加标回收率
表3：红酒样品加标回收率
8、相关产品信息
