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【应用分享】三黄片中大黄的含量测定
发布时间：
2025-10-11
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三黄片
Sɑnhuɑng Piɑn
三黄片，中成药名。为清热剂，具有清热解毒，泻火通便功效。主治三焦热盛，目赤肿痛，口鼻生疮，咽喉肿痛，心烦口渴，尿黄便秘。其有效成分为大黄、盐酸小檗碱、黄芩浸膏。
2025版《中国药典》中对三黄片的三种有效成分分别进行含量测定。本实验采用中谱红®ODS-H 4.6*250mm 5μm色谱柱测定三黄片中的大黄，其分离度与理论塔板数均符合药典要求，且峰的对称性良好。
色谱条件
色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：中谱红®ODS-H 4.6*250mm 5μm；
流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）；
检测波长：254nm；
柱温：30℃。
理论板数按大黄素峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取大黄素对照品和大黄酚对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯（2∶1）的混合溶液制成每1ml含大黄素10μg、大黄酚25μg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过三号筛），取约0.26g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入乙醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置烧瓶中，蒸干，加30%乙醇-盐酸（10∶1）的混合溶液15ml，置水浴中加热回流1小时，立即冷却，用三氯甲烷强力振摇提取4次，每次15ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯（2∶1）的混合溶液溶解，转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
色谱结果
图1 大黄素对照品和大黄酚对照品色谱图及峰表
图2 三黄片样品色谱图及峰表
色谱柱简介
中谱红®ODS-H⾊谱柱⾤⽤聚合型键合⾼密度C18，并经过特⾊封尾技术处理。其对中药、⻝品中基质复杂化合物及化学药中杂质分离有⽐较明显改善，提⾼温度对选择性会更好。
色谱参数
订货信息
微信号丨中谱科技
中谱简介
中谱科技是一家集国内外色谱和生物磁珠领域优质资源和技术力量，拥有自主知识产权、具备自主创新研发团队和科研基地、生产和销售为一体的色谱和生物磁珠产品和技术服务型的国家高新技术企业。
我们具备独立研发、生产及检测能力的样品前处理、液相及气相色谱柱、制备纯化等品类齐全的色谱分离材料产品线，同时拥有开发和生产销售特异性标记与捕获，蛋白快速分离与纯化，核酸提取与文库构建，及高通量、自动化生物样本处理综合磁技术平台产品包括磁性纳米颗粒、介孔纳米材料、磁性微球等，为分子诊断、免疫化学发光、医学影像诊断的磁共振造影、细胞及生物分子的标记以及蛋白和细胞分离纯化、生物分子和药物装载等领域提供新型、高效的产品和解决方案。
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